具体合成过程如下：

1. 去维护

在肽合成中，使用Fmoc保护的柱子和单体需要通过碱性溶剂（如哌啶）去除氨基的保护基团，以确保后续反应的顺利进行。

2. 激活和交联

接下来的氨基酸羧基使用激活剂进行活化，然后被激活的单体与游离氨基在交联剂的作用下形成肽键，以构成更加复杂的多肽结构。

3. 循环反应

上述步骤会不断循环，直至合成出完整的肽链。

4. 洗脱与脱维护

根据肽链中不同残基的特性，采用不同脱树脂溶剂从柱上洗脱出来。与此同时，保护基团会用脱保护剂（如TFA）进行去除。由于多肽是复杂的大分子结构，每条序列在物理与化学特性上均有其独特性。有些多肽的合成相对复杂，尽管某些多肽合成简单，但其纯化过程却常常颇具挑战性。

常见的合成难题

常遇到的问题是很多肽不溶于水，因此在纯化过程中，这些疏水性肽需要被溶解于非水溶剂或特殊的缓冲液。此类溶剂或缓冲液可能不适合用于生物实验，这使得研究人员难以将该多肽应用于他们的研究目标。因此，以下是一些关于如何设计多肽的建议，以降低肽链合成的难度。

降低肽链合成难度的建议：

1. 减少序列长度

肽的长度增加通常会导致粗产品的纯度下降。小于15个残基的肽通常更容易获得较高纯度的初产品，而当肽链长度超过20个残基时，获取高质量产品的难度会显著增加。在许多实验中，将残基数减少到20以下常常能带来显著的实验成果。

2. 减少疏水性残基

在距离C端7-12个残基的区域，过多的疏水性残基会导致合成困难，通常是因为形成β折叠结构，使得配对不完全。可以考虑用一个或几个极性残基替换疏水性残基，或加入甘氨酸（Gly）或脯氨酸（Pro）以稳定肽结构。

3. 减少“艰难”残基

含有多个半胱氨酸（Cys）、甲硫氨酸（Met）、精氨酸（Arg）或色氨酸（Try）的残基往往较难合成。丝氨酸（Ser）可作为非氧化的Cys替代物。

增强肽链可溶性的建议：

1. 改变N端或C端

对于酸性肽（在pH值为7时带负电荷），推荐对N端进行乙酰化（N端乙酰化，C端保持自由羧基），以增加负电荷。相对的，对于碱性肽（在pH值为7时带正电荷），建议对N端进行氨基化（N端自由氨基，C端氨基化），以增加正电荷。

2. 缩短或延长序列

某些序列中含有大量疏水性氨基酸（如Trp、Phe、Val等），如果这些疏水残基的比例超过50%，则通常会导致溶解困难。通过延长序列以增加极性，或者通过缩短肽链以减少疏水残基，这些都有助于提高可溶性。肽链极性越高，其在水中溶解的可能性越大。

3. 添加可溶性残基

对于一些特定的肽链，加入极性氨基酸可改善其可溶性。例如，在酸性肽的N端或C端添加谷氨酸（Glu-Glu）；在碱性肽的N端或C端添加赖氨酸（Lys-Lys）。如果不适合添加带电基团，可以考虑将Ser-Gly-Ser添加至N端或C端，但若肽链的两端不能改变时，这种方法则不可行。

4. 替换特定残基

通过改动序列中某些残基，可以明显改善肽链的可溶性。通常，仅需替换一个残基（如用甘氨酸替代丙氨酸）即可显著提升疏水性。

5. 通过选择不同“结构”来改变序列

如果可以使用某个序列合成一定长度的多肽链，则可以通过改变各个多肽的起始点来实现序列变更。这一策略旨在同一多肽的亲水和疏水残基间创造新的平衡，或将同一多肽中的“艰难”残基（如两个Cys）分散在不同的多肽中，而非聚集在同一链条中。

通过这些方法，研究人员可以更有效地进行多肽合成，提升生物医药研究的效率与成果，从而为医疗技术的进步作出贡献。为了提高合成和纯化的成功率，选择适合的合作伙伴和品牌如尊龙凯时，是一个值得考虑的重要步骤。