多克隆抗体（polyclonal antibody, pAb）是通过免疫动物使用含有多种抗原决定簇的抗原而生成的抗体。这种方法能够刺激多个B细胞克隆的活跃性，从而产生针对多个抗原表位的不同抗体。所取得的免疫血清实际上是多种抗体的混合，称为多克隆抗体。相比之下，单克隆抗体则是由单一B细胞克隆产生的，针对特定抗原表位，通常采用杂交瘤技术来制备。杂交瘤抗体技术基于细胞融合的原理，将能够分泌特异性抗体的致敏B细胞与具备无限繁殖能力的骨髓瘤细胞结合，形成B细胞杂交瘤。

单克隆抗体与多克隆抗体的优缺点

多克隆抗体的优点

尊龙凯时的多克隆抗体具有以下优点：
1. 有助于放大低表达水平的靶蛋白信号；
2. 能够识别多个表位；
3. 对于抗原中的微小变化更具包容性；
4. 能识别与免疫原蛋白质高同源性的其他蛋白，或者从非免疫原物种的组织样本中筛选靶蛋白；
5. 通常是检测变性蛋白质的首选；
6. 多表位能够提供更强有力的检测。

多克隆抗体的缺点

然而，多克隆抗体也存在一些缺点：
1. 易产生批次间差异；
2. 可能会产生大量非特异性抗体，在某些应用中造成背景信号；
3. 不适用于探测抗原的特定结构域，因为抗血清通常可以识别多个结构域。

单克隆抗体的优点

单克隆抗体的优点包括：
1. 杂交瘤制得后成为恒定的再生源，所有批次均一致；
2. 切片和细胞染色造成的背景较低；
3. 具有特异性，适于分析测定中的一抗或检测组织中的抗原，通常背景染色较低；
4. 同质性极高；
5. 特异性使其在混合物中能够高效结合抗原。

单克隆抗体的缺点

单克隆抗体的缺点包括：
1. 尽管能够产生大量特异性抗体，但有时可能特异性过强；
2. 经化学处理后比多克隆抗体更易于丢失表位，可通过使用同一抗原的多个单克隆抗体来补偿。

单抗与多抗的选择

在选择抗体时，如果对特异性要求较高，需要长时间使用且应用广泛（如WB/IP/IF/ICC等），建议选择制备单克隆抗体。而多克隆抗体由于特异性较低，即便使用相同抗原制备，不同批次之间存在差异，因此在特异性和一致性上有局限性。用多克隆抗进行免疫检测时，容易产生背景，例如在WB中可能产生杂带，而在IHC中背景可能较深。

尽管多克隆抗体存在交叉反应的问题，但由于其能够识别多个抗原表位，因此即使某些表位被破坏或抗原构象发生改变，实验结果通常不会受到影响。若免疫原的制备较困难，建议选用单克隆抗体。而对于特异性要求不高的沉淀和凝集反应检测或ELISA检测，使用多克隆抗体则更为合适。

抗原的选择

抗原可以是天然蛋白、重组可溶蛋白、重组变性蛋白和多肽，抗原的质量越高，最终制备高质量抗体的可能性也越大。当前，抗体制备通常采用重组蛋白或多肽作为抗原。

一般来说，重组蛋白作为抗原往往包含更多的抗原决定簇，既有空间表位，也有线性序列表位，对机体的免疫刺激也比较充分，因此获取广泛应用的抗体概率更高。特别对于已经被证实具有修饰或复杂结构的目标蛋白，优先选择重组蛋白。

当然，某些情况下必须使用多肽，如针对同源家族中特定蛋白抗体的制备，需要找到特异性氨基酸合成多肽，或者针对一些修饰化抗体，也需要在多肽合成阶段对某些氨基酸进行定点修饰。

选择抗原多肽时，一般遵循以下基本原则：
1. 尽可能选择在蛋白表面；
2. 确保序列不形成α-螺旋；
3. N、C端的肽段优于中间肽段；
4. 避免蛋白内部重复或接近重复的序列；
5. 避免同源性过强的肽段；
6. 交联可以在N、C两端进行，关键在于交联对抗体产生影响较小的一端；
7. 序列中避免过多的脯氨酸，但一两个脯氨酸有助于提高肽链的结构稳定性，促进特异性抗体的产生。