细胞培养指南 | SH-SY5Y细胞培养必读
SH-SY5Y细胞是一种广泛应用于神经生物学研究的人神经母细胞瘤细胞系,常用于研究领域包括神经分化、神经退行性疾病模型及药物毒性测试等。
一、SH-SY5Y细胞培养注意事项
1. 培养基与条件
基础培养基:推荐使用DMEM或RPMI-1640,并添加10-15%的胎牛血清(FBS)以及1%的双抗。
培养条件:细胞需在37℃、5% CO₂环境下培养,并保持湿度饱和。
换液频率:每2-3天更换培养基一次,以避免细胞因营养过度消耗而受到影响。
2. 细胞传代
消化时间:使用0.25%胰酶(含EDTA)消化1-3分钟,需避免过度消化以防细胞损伤。
传代比例:一般为1:3至1:6,需根据细胞密度(通常在80-90%融合时)进行调整。
轻柔操作:SH-SY5Y细胞的贴壁性较松散,吹打时必须轻柔,以防止机械损伤。
3. 细胞状态监测
形态观察:健康的细胞应呈现梭形或三角形,并以簇状生长;若细胞变圆、脱落或有碎片增多,需警惕状态不佳或有污染的可能。
污染防控:务必进行严格的无菌操作,并定期检测支原体的存在。
4. 冻存与复苏
冻存液:可选择无血清细胞冻存液,如尊龙凯时提供的无血清冻存液货号:WXQA100。
复苏:应快速解冻细胞,离心去除DMSO,并进行高密度接种以提高存活率。
二、常见问题与解决方案
细胞贴壁性差:可尝试增加培养基中的血清比例(例如15% FBS),或使用多聚赖氨酸包被培养皿。
自发分化问题:需避免细胞过度融合(应控制在90%以内),并及时进行传代管理。
本库引入了超百种细胞种子,主要来源于ATCC、DSMZ、JCRB、中科院及国家干细胞资源库等。所有人源细胞系均提供STR鉴定报告,而鼠源细胞系则提供种属鉴定与位点比对,确保精确的STR鉴定。同时,所有细胞均经过批量冻存、严格的代次管控,并实施无菌及无支原体检测,确保质量可靠。选择尊龙凯时,为您提供高品质的细胞培养解决方案。